A. Reagentia voor weefseltypering te gebruiken bij cytotoxische technieken op lymphocyten
Deze reagentia moeten, wanneer zij worden gebruikt volgens de door de producent aanbevolen
techniek, reageren met alle lymphocyten waarvan men weet dat ze het antigeen (de antigenen)
bevatten, overeenkomende met de specificiteit(en) vermeld op het etiket. Ze mogen
niet reageren met cellen waarvan men weet dat ze dit antigeen (deze antigenen) niet
bevatten. Indien een enkel reagens niet aan deze voorwaarden voldoet, dient een combinatie
van vier sera van dezelfde specificiteit tegelijk te worden gebruikt. In dit geval
dienen ten minste drie sera te reageren met elk lymphocytspecimen dat het overeenkomende
antigeen bevat en omgekeerd dient er niet meer dan een te reageren met cellen die
dit antigeen niet bevatten.
Wanneer deze reagentia worden gebruikt volgens de door de producent aanbevolen techniek
mogen er geen storende serologische verschijnselen voorkomen als:
B. Reagentia voor weefseltypering voor gebruik bij een complementfixatietechniek op bloedplaatjes
Deze reagentia moeten, wanneer zij worden gebruikt volgens de door de producent aanbevolen
techniek, complementfixatie geven met alle bloedplaatjes waarvan men weet dat ze het
antigeen (de antigenen) bevatten, overeenkomende met de specificiteit(en) vermeld
op het etiket. Zij mogen geen complementfixatie geven met bloedplaatjes waarvan men
weet dat ze dit antigeen (deze antigenen) niet bevatten. Indien een enkel reagens
niet aan deze voorwaarden voldoet, dient een combinatie van vier sera van dezelfde
specificiteit tegelijk te worden gebruikt. In dit geval dienen ten minste drie sera
te reageren met elk specimen bloedplaatje dat het overeenkomende antigeen bevat en
omgekeerd dient er niet meer dan een te reageren met cellen die dit antigeen niet
bevatten.
Wanneer deze reagentia worden gebruikt volgens de door de producent aanbevolen techniek
mogen er geen storende serologische verschijnselen voorkomen als:
A. Reagentia voor weefseltypering te gebruiken bij cytotoxische technieken op lymphocyten
De titer van het reagens wordt bepaald door opeenvolgende tweevoudige oplossingen
te maken van het serum dat wordt bestudeerd in een niet-actief AB-serum of in een
ander passend verdunningsmiddel van een donor die negatief is voor het antigeen (de
antigenen), overeenkomende met de antistof(fen) in het reagens, en die ook niet geïmmuniseerd
mag zijn tegen weefselantigenen als gevolg van transfusie, zwangerschap of door andere
middelen. Elke oplossing wordt dan onderzocht met lymphocyten waarvan men weet dat
ze het (de) overeenkomende antigeen (antigenen) bevatten in het reagens, waarbij de
door de producent aanbevolen techniek wordt toegepast. De titer is het omgekeerde
van het getal dat de hoogste serumoplossing aangeeft, waarin een duidelijke positieve
reactie voorkomt; hierbij wordt de oplossing berekend zonder rekening te houden met
het volume van de cellulaire suspensie of enige andere toevoeging aan het totale volume.
B. Reagentia voor weefseltypering voor gebruik bij een complementfixatietechniek op bloedplaatjes
De titer van het reagens wordt bepaald door opeenvolgende tweevoudige oplossingen
te maken van het serum dat wordt bestudeerd in een oplossing die niet-actief AB-serum
in een Veronal-buffer bevat in een verhouding 1 op 100. Elk serum wordt dan onderzocht
met bloedplaatjes waarvan men weet dat ze het antigeen bevatten dat homoloog is met
de antistoffen in het reagens, waarbij de door de producent aanbevolen techniek wordt
toegepast. De titer is het omgekeerde van het getal dat de hoogste serumoplossing
aangeeft waarin een duidelijke positieve reactie voorkomt; hierbij wordt de oplossing
berekend zonder rekening te houden met het volume van de cellulaire suspensie of enige
andere toevoeging aan het totale volume.
Overige bepalingen betreffende reagentia voor weefseltypering, te gebruiken zowel
bij cytotoxische technieken op lymphocyten als bij reagentia te gebruiken bij een
complement-fixatietechniek op bloedplaatjes:
Reagentia voor weefseltypering kunnen worden bewaard in vloeibare of droge vorm. Vloeibare
reagentia moeten worden bewaard bij een temperatuur die niet boven -40oC komt, gedroogde reagentia bij een temperatuur die niet boven + 4°C komt.
Het ontdooien en opnieuw invriezen van de reagentia gedurende de periode van opslag
moet zoveel mogelijk worden vermeden.
Gedroogde reagentia moeten worden bewaard in een atmosfeer van edelgassen of in vacuo
in de container waarin ze werden gedroogd en die moet worden gesloten ten einde vocht
buiten te sluiten. Een gedroogd reagens mag niet meer dan 0,5% van zijn gewicht verliezen
wanneer het onderzocht wordt door verder drogen boven fosforpentoxide, onder een kwikdruk
die niet meer bedraagt dan 0,02 mm gedurende 24 uur.
De reagentia moeten worden bereid met de nodige aseptische voorzorgsmaatregelen en
moeten vrij zijn van bacteriologische besmetting. Ten einde bacteriologische groei
te voorkomen kan de producent ertoe overgaan aan het reagens een antisepticum en/of
antibioticum toe te voegen. In dergelijke gevallen moet het reagens blijven voldoen
aan de vereisten voor specificiteit en sterkte bij aanwezigheid van de toegevoegde
stof.
Het bovengenoemde is ook van toepassing op alle andere additieven zoals antistollingsmiddelen.
De reagentia moeten, na ontdooiing of reconstructie, doorzichtig zijn en mogen geen
bezinksel, gel of zichtbare deeltjes bevatten.
4. Stabiliteit en vervaldatum
Elk reagens moet, wanneer het onder de juiste omstandigheden is opgeslagen, de vereiste
eigenschappen gedurende ten minste één jaar behouden.
De vervaldatum van een reagens in vloeibare staat, zoals aangegeven op het etiket,
mag niet meer dan één jaar liggen na de datum van de laatste sterktetest met bevredigend
resultaat. De vervaldatum kan telkens voor een periode van een jaar worden verlengd
door herhaling van de sterktetest.
Reagentia voor weefseltypering moeten zodanig en in zulke hoeveelheden worden bereid
dat de hoeveelheid reagens in elke container voldoende is voor het doen van proeven
met onbekende cellen, alsmede voor het doen van proeven met positieve en negatieve
controlecellen.
De inhoud van een container moet zodanig zijn dat deze, indien nodig, kan worden gebruikt
voor het uitvoeren van de sterktetests als in dit Protocol omschreven.
6. Bewaring van de resultaten en monsters
Het producerend laboratorium dient aantekening te houden van alle handelingen verricht
in de produktie en controle van reagentia voor weefseltypering. Het laboratorium dient
voldoende monsters van alle afgegeven reagentia aan te houden tot redelijkerwijs kan
worden aangenomen dat de desbetreffende partij niet langer wordt gebruikt.
Bevroren reagentia moeten worden verzonden op zodanige wijze dat ze in bevroren toestand
blijven totdat ze zijn aangekomen. Er dient gezorgd te worden voor de bescherming
van reagentia tegen neutralisatie door toetreding van CO2. Gedroogde reagentia kunnen worden verzonden bij omgevingstemperatuur.
8. Etiketten, bijsluiters en verklaringen
Twee etiketten, één gedrukt in het Engels en één in het Frans, in zwarte letters op
wit papier, moeten worden bevestigd op iedere eindcontainer en moeten de volgende
gegevens bevatten:
-
a. naam en adres van de producent;
-
b. de specificiteit van het reagens;
-
c. naam en hoeveelheid van het eventueel aanwezige antisepticum en/of antibioticum of
een aanduiding van de afwezigheid daarvan;
-
d. het volume of, wanneer het reagens gedroogd is, het volume en de samenstelling van
de vloeistof nodig voor reconstructie;
-
e. vervaldatum;
-
f. identificatie;
-
g. wijze van bewaring;
-
h. resultaten van de HBsAg proef.
Bovendien moet de bijsluiter die bij de containers hoort, de volgende gegevens bevatten:
-
a. volledige naam en volledig adres van de producent;
-
b. de specificiteit van het reagens;
-
c. het volume of, wanneer het reagens gedroogd is, het volume en de samenstelling van
de vloeistof nodig voor reconstructie;
-
d. de datum van de laatste sterktetest;
-
e. eventuele vervaldatum;
-
f. de identificatie en (indien mogelijk) de naam van het reagens;
-
g. een door de producent aanbevolen duidelijke gebruiksaanwijzing, daarbij inbegrepen
de te gebruiken techniek en oplossing en het te gebruiken volume;
-
h. de wijze van bewaring van ongeopende ampullen en de voorzorgsmaatregelen die moeten
worden genomen na opening;
-
i. de juiste samenstelling met inbegrip van een eventueel toegevoegd antisepticum en/of
antibioticum;
-
j. een verklaring waaruit blijkt of het produkt al of niet stoffen van menselijke oorsprong
bevat;
-
k. de resultaten van de reacties + + ,-+, +-, - -, en de waarden van de coëfficiënt r
(serum/antigeen).
Elke zending moet worden vergezeld van een certificaat zoals bepaald in artikel 4
van de Overeenkomst en de Bijlage bij dit Protocol. Een voorbeeld van het etiket en
van de bijsluiter is aan dit Protocol gehecht.
BIJZONDERE BEPALINGEN
VOORBEELD VAN EEN ETIKET
RAAD VAN EUROPA
Europese Overeenkomst inzake de uitwisseling van reagentia voor weefseltypering
-
a. Nationaal referentie-laboratorium voor weefseltypering: 1 Main Street, Metropolis,
Westland
-
b. Reagens voor weefseltypering anti-HLA-A1
-
c. Een N3Na oplossing van 1 g per liter is toegevoegd
-
d. Volume: 1 ml
of: Te reconstrueren met 1 ml gedistilleerd water
-
e. Vervaldatum: 5 december 1985
-
f. Identificatie
-
g. Te bewaren bij -40 °C
-
h. Resultaat van de HBsAg proef: ...
Dit etiket dient te worden bevestigd aan iedere eindcontainer.
VOORBEELD VAN EEN BIJSLUITER
RAAD VAN EUROPA
Europese Overeenkomst inzake de uitwisseling van reagentia voor weefseltypering
-
a. Volledige naam en volledig adres van de producent
-
b. Reagentia voor weefseltypering anti-HLA-A1
-
c. Volume: 1 ml
(of: Te reconstrueren met 1 ml gedistilleerd water)
-
d. Datum van de laatste sterktetest
-
e. Vervaldatum
-
f. Identificatie en (indien mogelijk) naam van het reagens
-
g. Gebruiksaanwijzing; te gebruiken techniek; NIH-lymphocytotoxiciteit, enz.
-
h. Te bewaren bij: (temperatuur, ...)
-
i. Samenstelling
-
j. Het reagens bevat menselijk serum
-
k. Resultaten van reacties:
Serum/antigeen r = 0,90
Deze bijsluiter dient te worden gevoegd bij een pakket dat verscheidene eindcontainers
bevat.